مقدمه و هدف: سرطان ریه، دومین سرطان شایع در جهان است. رده سلولی COR-L105 بهعنوان یکی از معروفترین ردههای سلولی سرطان ریه در تحقیقات مختلف مورد استفاده قرار میگیرد. RNAهای غیر کدکننده بلند (lncRNAs)، دستهای از فاکتورهای مهم سلولی هستند که در فرآیندهایی نظیر رشد، تمایز، تکثیر، رونویسی، ترجمه و غیره نقش اساسی ایفا می کنند. نوعی lncRNA به نام LINC00511، یک تنظیم کننده رونویسی است و افزایش بیان آن در سرطانهای مختلف گزارش شده است. هدف از این تحقیق حذف ژن LINC00511 با استفاده از تکنیک پیشرفته CRISPR/Cas9 در سلولهای COR-L105 و بررسی اثرات آن بر پیشرفت سرطان و آپوپتوز است. روش کار: در این تحقیق تجربی، دو نوع sgRNA برای ژن LINC00511 طراحی و در دو وکتور کریسپری به صورت جداگانه کلون شدند. با استفاده از لیپوفکتامین، دو وکتور حامل sgRNAها به سلول های COR-L105 منتقل شدند. پس از تأیید حذف ژن LINC00511 از سلول های هدف، میزان تغییرات در تکثیر سلولی و آپوپتوز با روش های MTT و فلوسیتومتری سنجیده شد. علاوه بر آن، بیان ژن های مرتبط با آپوپتوز و تومورزایی به روش real time PCR مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها: حذف ژن LINC00511 در اثر کریسپر، از ژنوم رده سلولی COR-L105 انجام شد. بیان ژنهای BCL2، survivin، EZH2، c-MYC و MAX در سلولهای تحت تیمار (ویرایش شده) نسبت به سلولهای گروه کنترل بهصورت معنیداری کاهش یافت (0/05>p). افزایش بیان ژن های p21 و p57 نیز در سلول های ویرایش شده دیده شد (0/05>p). کاهش تکثیر سلولی و افزایش میزان آپوپتوز در سلول های دست ورزی شده مشاهده شد. نتیجه گیری: تخریب ژن LINC00511 در سلول های رده سرطان ریه سبب بروز آپوپتوز و کاهش تکثیر سلولی گردید. بنابراین به نظر می رسد، جلوگیری از بیان ژن LINC00511 در سلولهای سرطانی، سبب کنترل تکثیر آنها میشود. |
بازنشر اطلاعات | |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |